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酸性ホスファターゼの活性実験
目的
p-nitrophenyl phosphateを基質とした、酵素反応生成物のp－nitrophenolを最大吸収波長400 nmにおいて比色定量することで、各画分(A、B、C、D)における酸性ホスファターゼの活性を測定する。また、各画分への酸性ホスファターゼ活性の分布と回収率を求める。
実験方法
教科書V‐９からV‐11頁までの方法に従っておこなった。
実験結果・考察
３－１．酵素液希釈度の検討(酵素濃度と反応速度の関係)
４種類の画分(A～D)の透析酵素試料を、４倍、８倍、16倍、32倍希釈にして、酵素反応の吸光度を測定した結果を下表１に示した。
表１．A画分の酵素液希釈率と吸光度(400 nm) ※すべて補正値
酵素 時間(min.) 吸光度(32倍) (16倍) (８倍) (４倍) A＋ 30 0.050 0.170 0.303 0.606
B＋ 30 0.006 0.020 0.105 0.235
C＋ 30 0.210 0.426 0.854 1.630
D＋ 30 -0.0...
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