血清タンパク質の電気泳動とAG比

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資料紹介

【目的】
色素法によって、血清タンパク質濃度およびアルブミン濃度を調べること。また、AG比を求め血清タンパク質の詳細を学ぶ。
【方法・結果】
~色素法によるアルブミン/グロブミン比測定~
a) ブランク(水)、アルブミン標準液、検液(ウ)、検液(エ)を25µlずつそれぞれ2本ずつ試験管に入れ、それぞれに発色試薬を5.0ml加えた。すると黄色である発色試薬が、アルブミン標準液と検液(ウ)では黄緑色に、検液(エ)では緑色になった。
b) それらを混和し25℃で35分間放置後、ブランクを対照として630nmで比色、それぞれの吸光度を測定した。
吸光度　平均ブランク引いた吸光度ブランク(水) 0.095 0.0845 ブランク(水) 0.074 アルブミン標準液 0.462 0.484 0.3995 アルブミン標準液 0.507 検液(ウ) 0.477 0.487 0.348 検液(ウ) 0.497 検液(エ) 0.770 0.739 0.60 検液(エ) 0.708
c）検体(ウ)、検体(エ)のアルブミン濃度を求めた。
アルブミン濃度(mg/ml) ＝ {(検液の吸光度) / (標準液の吸光度)} × 40
　・検体(ウ) ＝ 0.348 / 0.3995 × 40 ＝ 34.84355 ≒ 34.8435 (mg/ml)
・検体(エ) ＝ 0.60/ 0.3995 × 40 ＝ 60.0750 ≒ 60.075 (mg/ml)
d）前回測定した検液(ウ)、検液(エ)のタンパク濃度(mg/ml)より今回測定したアルブミン濃度を引き、グロブリン量を算出した。
前回測定したタンパク濃度
検体(ウ)＝95.325　検体(エ)＝85.225
A/G比　検体(ウ) ＝ 34.8435 / ( 95.325－34.8435 ) ＝ 0.5495
　　　　検液(エ) ＝ 60.075 / ( 85.225－60.075 ) ＝ 1.0253
～血清タンパク電気泳動法～
500nmでのOD値を出し、OD値の総和に対する各画分ODの割合を出した。
１２３４アルブミン 0.142 0.017 0.002 ‐0.020 検体(ウ) 0.208 0.174 0.173 0.155 検体(エ) 0.273 0.185 0.145 0.133
OD値の総和に対する各画分ODの割合(％)
・アルブミン
全体＝ア-１＋ア-２＋ア-３＋ア-４＝0.161
ア-１＝0.142 / 0.161×100＝88%
ア-２＝0.017 / 0.161×100＝10%
ア-３＝0.002 / 0.161×100＝2%
・検体(ウ)
全体＝ウ-１＋ウ-２＋ウ-３＋ウ-４＝0.71
ウ-１＝0.208 / 0.71×100＝29%
ウ-２＝0.174 / 0.71×100＝24%
ウ-３＝0.173 / 0.71×100＝24%
ウ-４＝0.155 / 0.71×100＝21%
・検体(エ)
全体＝エ-１＋エ-２＋エ-３＋エ-４＝0.736
エ-１＝0.273 / 0.736×100＝37%
エ-２＝0.185 / 0.736×100＝25%
エ-３＝0.145 / 0.736×100＝19%
エ-４＝0.133 / 0.736×100＝18%
【考察】
血液中の血球成分（赤血球、白血球、血小板）以外の液状成分を血清といい、血清中に含まれるタンパク質の総量を血清総蛋白（ＴＰ）といい、主にアルブミンと４種類（α1、α2、β、γ）のグロブリンからなっている。アルブミン量とグロブリン量の